化學分析中,基質指的是樣品中被分析物以外的組分。基質常常對分析物的分析過程有顯著的干擾,并影響分析結果的準確性。例如,溶液的離子強度會對分析物活度系數有影響,這些影響和干擾被稱為基質效應(matrix effect)。
一、什么是基質效應?
基質是指的是樣品中被分析物以外的組分。基質常常對分析物的分析過程有顯著的干擾,并影響分析結果的準確性。
目前最常用的去除基質效應的方法是,通過已知分析物濃度的標準樣品,同時盡可能保持樣品中基質不變,建立一個校正曲線(calibration curve)。固體樣品同樣有很強的基質效應,對其校正也尤為重要。
對于復雜的或者未知組分基質的影響,可以采用標準添加法(standard addition method)。在這一方法中,需要測量和記錄樣品的響應值。進一步加入少量的標準溶液,再次記錄樣品的響應值。理想地說來,標準添加應該增加分析物的濃度1.5到3倍,同時幾次添加的溶液也應該保持一致。使用的標準樣品的體積應該盡可能小,盡量降低過程中對基質的影響。
二、評價方法
較簡單的采用相對響應值法
A:在純溶劑中農藥的響應值 B:樣品基質中添加的相同含量農藥響應值
基質效應Matrix Effect (%)=B/A×100
比較復雜的標準曲線測定法
配制3組標準曲線。第1組用有機溶劑配制成含系列濃度待測組分和內標的標準曲線,可以做5個重復。第2組標準曲線是將5種不同來源或不同品種的的空白樣品經提取后加入與第1組相同系列濃度的待測組分和內標后制得。第3組標準曲線采用與第2組相同的空白樣品在提取前加入與第1組相同系列濃度的待測組分和內標后再經提取后制得。
通過比較3組標準曲線待測組分的絕對響應值、待測組分與內標的響應值比值和標準曲線的斜率,可以確定基質效應對定量的影響。第1組測定結果可評價整個系統的重復性。第2組測定結果同第1組測定結果相比,若待測組分響應值的相對標準偏差明顯增加,表明存在基質效應的影響。對第3組測定結果,若待測組分響應值的相對標準偏差明顯增加,表明存在基質效應和提取回收率因樣品來源不同而產生的共同影響。
三、稀釋樣品時稀釋物不對為何有基質效應?
我們在稀釋樣品時要考慮到基質效應的影響,稀釋必須在適當的基質中進行,對于大多數測定而言,適當的基質就是零校準品,如果分析物稀釋基質效應中所含成分濃度不正確,稀釋回收率就不能對它們進行準確的測定,因為它們稀釋后會與Bing agent形成新的平衡。
四、化學發光的測定如何避免基質效應的影響?
(1)免疫化學發光測定中的基質效應是一個現象的描述,它是指干擾、抗原抗體反應,而與分析物本身無關的非特異性因素,同一基質狀態的基質效應隨方法及檢測條件而異。
(2)基質效應是絕對的,只要處理過的樣品和測定樣品的基質狀態不一,一定有基質效應,基質效應又是相對的,只要認可某一方法的基質效應可忽略不計,或者由基質效應對某方法引入的誤差在可接受的水平,那么衡量另一方法是否具有基質效應時,應作方法學比較,若處理過的樣品和測定樣品的結果分布不同,說明基質效應明顯,反之屬可接受,也就是可以認為無基質效應。
(3)嚴格講,不同批號試劑,它們產生的基質效應也不一致,所以廠家一般都是批次定標。
(4)度量有無基質效應,或者了解不同方法間的可比性,最佳樣品是人新鮮標本。
(5)一定要懂得單一標準液,校準品,質控品和新鮮樣品間的區別,并正確使用。
(6)不應用質控品作為校準品去校準儀器,不僅是會有基質效應帶來的差異,而且校準品和質控品定值的水品也不一致。
(7)室內質控用的質控品僅用于各檢驗科日常工作中的重復性和精密度的控制,由于各檢驗科的檢驗方法和廠商定值的方法不一致,不可將定值血清的靶值來定值。
(8)衡量某一方法或試劑是否準確可靠,唯一可信的方法是使用人新鮮樣本進行比較,僅以質控品測定值相似或等于定值,不足以說明方法的準確度。
(9)校準品是廠家指定用來校準某測定系統(儀器+試劑+方法)的,是考慮到它具有基質效應的情況下,人為賦予校準品的校準值,因此校準品必須專用于某一測定系統。檢驗科應盡量使用廠商指定的試劑和校準品及質控品。
(10)同一個校準品用于不同儀器時,應該有不同的校準值,不能使用某一校準品的校準值對各種不同儀器作校準。
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