我們應該都清楚,在免疫診斷試劑配方中,常常要用到阻斷劑,以提高特異性,但是我們往往忽略了以下幾個方面。
它主要用于減少非特異性結合,避免由此帶來的檢測干擾。在免疫檢測過程中,樣本中的一些物質會與檢測試劑發生非特異性結合,導致假陽性或假陰性結果。免疫阻斷劑可以通過與這些干擾物質結合或阻斷其結合位點,從而保證檢測的特異性和準確性。在酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中,免疫阻斷劑能有效抑制樣本中異嗜性抗體(HA)、人抗小鼠抗體(HAMA)等干擾物質的影響,使檢測信號更真實地反映目標物質的存在和含量 。
但是過度使用免疫阻斷劑會帶來以下問題:
1.免疫阻斷劑的使用增加了檢測成本,這些試劑本身價格不菲,其生產、研發和質量控制都需要投入大量資源。每一次檢測中使用免疫阻斷劑,都會使檢測成本上升。
2.免疫阻斷劑的使用會帶來新的檢測風險,盡管其目的是消除干擾,但在實際應用中,它并非完全可靠。一些免疫阻斷劑自身存在質量不穩定的情況,不同批次的產品可能存在差異,這會影響檢測結果的重復性和一致性。此外,免疫阻斷劑與樣本中物質的相互作用復雜,有時會意外地與目標檢測物發生反應,或者影響檢測抗體與抗原的正常結合,從而產生新的檢測誤差。
3.免疫阻斷劑的使用會掩蓋一些潛在的信號,在某些情況下,樣本中出現的非特異性結合現象并非完全是干擾信號,它也許反映了患者體內一些特殊的生理或病理狀態。過度依賴免疫阻斷劑去消除這些“干擾”,會使我們錯過這些寶貴的信息,影響對疾病的全面認識和準確診斷。
4.那么,如何在免疫診斷中盡量減少免疫阻斷劑的使用呢?
一方面,我們應致力于提高免疫診斷試劑的特異性。通過優化抗體的設計和篩選,提高其對目標抗原的識別能力,降低與其他非目標物質的交叉反應。采用高親和力、高特異性的單克隆抗體,減少非特異性結合的可能性。另一方面,改進緩沖液或配方也十分關鍵。合理優化樣本處理步驟,調整樣本稀釋液,去除可能導致非特異性結合的雜質。
在免疫診斷試劑開發中,我們應秉持“能不用免疫阻斷劑,就盡量少用”的原則。通過不斷提高原料特異性、改進配方和樣本稀釋液,減少免疫阻斷劑的使用。
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