靈敏度評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據，也是產品注冊所需的重要申報材料之一。

靈敏度的定義可以理解為體外診斷試劑對待測樣本所能檢測到的最小量，有兩個含義：①最小濃度或含量的變化可以引起檢測信號的顯著變化；②具有適當的限度檢測出區別于零的待測物的最小濃度或含量。

體外診斷試劑的分析靈敏度也稱為檢測限，指檢測方法可檢測到的最低檢測濃度，即在統計學意義上能與零劑量區別的量。一般用95％可信限計算：重復測定空白樣本20次，計算20次反應測得的均值和標準差（SD），以平均值+2SD（夾心法）或平均值-2SD（競爭法）計算出相應的濃度，即為體外診斷試劑的分析靈敏度，也是注冊資料所需提供的內容。

1.分析靈敏度評估需要的材料和基本要求：

 空白樣本的制備：空白樣本應不含被測物，但其基質應與帶測定常規樣本相同。如空白樣本難以獲得，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據具體項目選擇相應基質的樣本，但是需要注意的是，要將基質效應減到最小。

2.實驗方法：  

 在一次運行中重復測定空白樣本20次。

3.數據處理：

1）數據記錄：將結果記錄于表格。如果檢測系統對于低于零的報告為零，應記錄初始響應值。

2）數據統計：計算20次平均值和標準差SD

3）標準差計算公式：

4）結果報告：

  分析靈敏度 = 平均值+2SD（夾心法）或平均值-2SD（競爭法） 

 體外診斷試劑的功能靈敏度與精密度相關，是以天間變異系數（CV）為20%時所對應的檢測限樣本具有的平均濃度。  

 1.計算方法：

 1）將低值樣本倍比稀釋后重復測定10次以上，計算每個低值樣本檢測信號的均值、標準差和變異系數（CV），選擇CV大于 20％時所對應的低值樣本平均濃度，這就是體外診斷試劑的功能靈敏度。 

 2）計算均值：                                          

 3）計算標準差：                                          

 4）計算變異系數：

4.提高靈敏度的方法：                                         

 1）抗原和抗體的親和性：兩者的親和性越高，靈敏度越高。  

 2）抗體的標記方法：標記信號物的放大效應可以提高靈敏度，如化學發光、膠體金、膠乳標記等。  

 3）抗原抗體反應時間：反應時間的適當延長，可以使抗原抗體的結合反應達到反應平衡，進而靈敏度也提高了。如在化學發光免疫診斷試劑中，抗原與抗體在液相中充分混合至少反應10分鐘以上，有時還需要震蕩反應以提高反應速率，這樣比較容易獲得較高靈敏度。

 4）包被抗體與標記物的量：在達到反應平衡的條件下，可以適當增加包被抗體和標記物的濃度，來提高靈敏度。如NC膜上的包被抗體、膠體金標記抗體，微球標記的抗體等。但NC膜的抗體吸附量有限，可以通過優化標記來提高靈敏度。微球是以公家偶聯的方式與抗體結合，其靈敏度較高于膠體金。

5）選擇靈敏度更高的表標記材料：膠體金是常用的標記物，但由于其具有較低的發光強度及較少的抗體吸附量，限制了膠體金免疫層析方法的靈敏度。而與抗體共價結合的材料，如鑭系元素，量子點，吖啶酯，膠乳微球等，有利于提高體外診斷試劑靈敏度。

6）發展信號放大系統：免疫層析技術靈敏度不高的原因主要是T、C線位置標記物信號不強，可以根據這一不足，優化放大系統的反應條件。有研究表明，通過添加銀增敏劑到膠體金免疫層析試劑條NC膜的方法可以提高檢測靈敏度10-100倍。另外，改變膠體金顆粒的大小，也可以提高靈敏度

7）濃縮樣本：通過濃縮的方法增加樣品的濃度，以提高體外診斷試劑的靈敏度10倍左右。

8）選擇優質的試紙條：如在膠體金免疫層析檢測方法中，不同的NC膜具有不同的孔徑、疏水性、親水性及其他性能的不同，會導致靈敏度的差異。

9）緩沖液體系：合適的緩沖液體系可以穩定抗原抗體的結合能力及抗干擾能力，因此，合適的緩沖液體系也可以體外診斷試劑的靈敏度。